Posted by on 11 lutego 2019

Rozpoznane warianty sekwencji zostały zbadane pod kątem segregacji we wszystkich dziewięciu dotkniętych chorobą osobach i dziewięciu nie dotkniętych chorobą osobnikach. Warianty sekwencji badano pod kątem ich obecności lub nieobecności w 200 kontrolnych allelach od czarnych osób i od białych osób (Coriell Institute for Medical Research). Zbadano także publiczne bazy danych (dbSNP, build 137 i projekt 1000 genomów, wydanie 12). Obserwowane nowe warianty sekwencji zostały ocenione pod kątem jednoznaczności, ochrony u różnych gatunków i potencjalnego wpływu na celowanie wewnątrzkomórkowe (patrz sekcja Metody w dodatkowym dodatku). Proksymalna, proksymalna rurkowa linia komórek
Trwale transfekowana, indukowalna nerkowa proksymalna rurkowa linia komórkowa pochodząca z komórek LLC-PK1 i niosąca zidentyfikowaną mutację w EHHADH została wytworzona przy użyciu technologii rekombinacji.9 Komórki LLC-PK1 są ustalonym modelem i niezawodnie wyrażają wiele właściwości proksymalnych nerek. kanalików.3,10 Badano nerkową i wewnątrzkomórkową lokalizację EHHADH; EHHADH bierze udział w oksydacyjnym utlenianiu kwasów tłuszczowych i ulega ekspresji w kanaliku proksymalnym. Transport płynów w kanaliku proksymalnym (tj. Tworzenie wypełnionych płynem kopuł i transport określonych substratów) oceniano przy użyciu ustalonych technik.11 W przypadku badań mikroskopem elektronowym i oceny funkcji oddechowej mitochondriów komórki przygotowywano i badano za pomocą zastosowanie ustalonych procedur12, 13 (patrz sekcja Metody w dodatkowym dodatku).
Koimmunoprecypitacja EHHADH
Niemanutujący EHHADH i zmutowany EHHADH poddano koimmunoprecypitacji z HADHA i HADHB (hydrataacyna hydroksyacyl-koenzym A [CoA] dehydrogenaza-3-ketoacylo-CoA tiolaza-enoilo-CoA), które są częścią kompleksu heterodimerycznego enzymu (mitochondrialne trifunkcyjne białko), z zastosowanie przeciwciała anty-HADHB. Immunoblot przeprowadzono za pomocą przeciwciała anty-EHHADH (szczegółowo w sekcji Metody w dodatkowym dodatku).
Ehhadh Knockout Myszy
My poprzednio wygenerowaliśmy myszy Ehhadh nokautujące, aby zbadać biochemiczną funkcję białka peroksysomalnego EHHADH.14 Myszy były żywe i nie miały wykrywalnych wady fenotypowej (ryc. Poziomy fosforanów w moczu i metabolitów w moczu oceniano u myszy z nokautem i myszy kontrolnych przy użyciu ustalonych procedur analitycznych.15 Badania kości przeprowadzono na myszach w wieku 45 i 51 tygodni. Szczegółowe informacje dotyczące badań na myszach z nokautem znajdują się w sekcji Metody w dodatkowym dodatku.
Wyniki
Badania rodzinne
Rysunek 1. Rysunek 1. Charakterystyka kliniczna członków rodziny. Rodzinny rodowód (panel A) pokazuje autosomalne dominujące dziedziczenie zespołu Fanconiego
[podobne: supremin ulotka, forum krzyżówkowicza, ulotka desmoxan ]

  1. Julian
    13 stycznia 2019

    [..] Cytowany fragment: najlepsze odchudzanie[…]

  2. Marcin
    15 stycznia 2019

    główną przyczyną nadciśnienia jest stan zapalny naczyń krwionośnych

  3. Barbara
    17 stycznia 2019

    [..] Odniesienie w tekscie do wysiłkowe nietrzymanie moczu[…]

  4. Aleksandra
    19 stycznia 2019

    moja matka jadła w życiu mnóstwo mleka

  5. Mad Jack
    21 stycznia 2019

    [..] odnosnik do informacji w naukowej publikacji odnosnie: pokrowce antyroztoczowe[…]

  6. Kitchen
    23 stycznia 2019

    Ja tam swoje wiem

Powiązane tematy z artykułem: forum krzyżówkowicza supremin ulotka ulotka desmoxan

Posted by on 11 lutego 2019

Rozpoznane warianty sekwencji zostały zbadane pod kątem segregacji we wszystkich dziewięciu dotkniętych chorobą osobach i dziewięciu nie dotkniętych chorobą osobnikach. Warianty sekwencji badano pod kątem ich obecności lub nieobecności w 200 kontrolnych allelach od czarnych osób i od białych osób (Coriell Institute for Medical Research). Zbadano także publiczne bazy danych (dbSNP, build 137 i projekt 1000 genomów, wydanie 12). Obserwowane nowe warianty sekwencji zostały ocenione pod kątem jednoznaczności, ochrony u różnych gatunków i potencjalnego wpływu na celowanie wewnątrzkomórkowe (patrz sekcja Metody w dodatkowym dodatku). Proksymalna, proksymalna rurkowa linia komórek
Trwale transfekowana, indukowalna nerkowa proksymalna rurkowa linia komórkowa pochodząca z komórek LLC-PK1 i niosąca zidentyfikowaną mutację w EHHADH została wytworzona przy użyciu technologii rekombinacji.9 Komórki LLC-PK1 są ustalonym modelem i niezawodnie wyrażają wiele właściwości proksymalnych nerek. kanalików.3,10 Badano nerkową i wewnątrzkomórkową lokalizację EHHADH; EHHADH bierze udział w oksydacyjnym utlenianiu kwasów tłuszczowych i ulega ekspresji w kanaliku proksymalnym. Transport płynów w kanaliku proksymalnym (tj. Tworzenie wypełnionych płynem kopuł i transport określonych substratów) oceniano przy użyciu ustalonych technik.11 W przypadku badań mikroskopem elektronowym i oceny funkcji oddechowej mitochondriów komórki przygotowywano i badano za pomocą zastosowanie ustalonych procedur12, 13 (patrz sekcja Metody w dodatkowym dodatku).
Koimmunoprecypitacja EHHADH
Niemanutujący EHHADH i zmutowany EHHADH poddano koimmunoprecypitacji z HADHA i HADHB (hydrataacyna hydroksyacyl-koenzym A [CoA] dehydrogenaza-3-ketoacylo-CoA tiolaza-enoilo-CoA), które są częścią kompleksu heterodimerycznego enzymu (mitochondrialne trifunkcyjne białko), z zastosowanie przeciwciała anty-HADHB. Immunoblot przeprowadzono za pomocą przeciwciała anty-EHHADH (szczegółowo w sekcji Metody w dodatkowym dodatku).
Ehhadh Knockout Myszy
My poprzednio wygenerowaliśmy myszy Ehhadh nokautujące, aby zbadać biochemiczną funkcję białka peroksysomalnego EHHADH.14 Myszy były żywe i nie miały wykrywalnych wady fenotypowej (ryc. Poziomy fosforanów w moczu i metabolitów w moczu oceniano u myszy z nokautem i myszy kontrolnych przy użyciu ustalonych procedur analitycznych.15 Badania kości przeprowadzono na myszach w wieku 45 i 51 tygodni. Szczegółowe informacje dotyczące badań na myszach z nokautem znajdują się w sekcji Metody w dodatkowym dodatku.
Wyniki
Badania rodzinne
Rysunek 1. Rysunek 1. Charakterystyka kliniczna członków rodziny. Rodzinny rodowód (panel A) pokazuje autosomalne dominujące dziedziczenie zespołu Fanconiego
[podobne: supremin ulotka, forum krzyżówkowicza, ulotka desmoxan ]

  1. Julian
    13 stycznia 2019

    [..] Cytowany fragment: najlepsze odchudzanie[…]

  2. Marcin
    15 stycznia 2019

    główną przyczyną nadciśnienia jest stan zapalny naczyń krwionośnych

  3. Barbara
    17 stycznia 2019

    [..] Odniesienie w tekscie do wysiłkowe nietrzymanie moczu[…]

  4. Aleksandra
    19 stycznia 2019

    moja matka jadła w życiu mnóstwo mleka

  5. Mad Jack
    21 stycznia 2019

    [..] odnosnik do informacji w naukowej publikacji odnosnie: pokrowce antyroztoczowe[…]

  6. Kitchen
    23 stycznia 2019

    Ja tam swoje wiem

Powiązane tematy z artykułem: forum krzyżówkowicza supremin ulotka ulotka desmoxan